Plazma IgM 96pcs Elisa Test Kiti HAV Diagnos Antikor Test Kiti

HAV IgM Elisa Kit 96 Test/Kit

Katalog No.: BE301A

1. İLKE

1. Bu kit, anti-HAV IgM'yi tespit etmek için yakalama ELISA yöntemini kullanır.Saflaştırılmış fare anti-insan IgM (μchain) antikoru, çoklu kuyucukların katı fazı üzerinde kaplanır.
2. Seyreltilmiş numune eklenip inkübe edildikten sonra kaplanmış oyuklara bir konjugat HAV-Ag eklenir.Daha sonra HAV-Ag etiketli yaban turpu peroksidaz eklenir.Numunede HAV-IgM mevcutsa, HRP ile etiketlenmiş bir Anti-μ-zincir-HAV-IgM –HAV-Ag -etiketli bir kompleks oluşacaktır.
3. Diğer bağlanmamış serum bileşenlerini çıkarmak için kuyuları yıkayın, renkli bir ürün oluşturmak için substrat (TMB) ile inkübe edin ve numunede HAV-IgM'nin varlığını veya yokluğunu belirtmek için 450 nm'de absorbansı ölçün.
4. Test özel, hassas, tekrarlanabilir ve kullanımı kolaydır.

2. SAĞLANAN MALZEMELER

1. Anti-μ-zincir Kaplamalı Mikro Kuyucuk Plakası 1 blok (96 kuyucuk)
2. Enzim Konjugantı (HAVAg-HRP) 1 şişe (6ml)
3. Konjugat HAV-Ag 1 şişe (6ml)
4. Negatif Kontrol Serumu 1 şişe (1ml)
5. Pozitif Kontrol Serumu 1 şişe (1ml)
6. 20 X Yıkama Tamponu (kullanımdan önce seyreltme) 1 şişe (30ml)
7. Yüzey A 1 şişe (6ml)
8. Substrat B 1 şişe (6ml)
9. Durdurma Çözeltisi (2M H2SO4) 1 şişe (6ml)
10. Plastik Poşet 1 torba
11. Mühür Kağıdı 3 adet
12. Manuel 1 adet

3. Test Prosedürü

1. Antikor IgM için ELISA Kitini Hepatit A Virüsüne (tüm reaktifler) ve numuneleri kullanımdan önce oda sıcaklığına getirin (yaklaşık 30 dakika).

2. Konsantre yıkama tamponunu ddH2O ile 1:19 oranında seyreltin.

3. Numuneyi (1:1000) fizyolojik tuzlu su ile seyreltin.

4. Her test için bir boş, iki pozitif ve üç negatif kontrol ayarlayın.Sırasıyla pozitif ve negatif kontrol kuyularına 100μl pozitif ve negatif kontrol serumu ekleyin.

5. 100μl seyreltilmiş numuneyi diğer test kuyucuklarına ekleyin.

6. Kuyuları mühürlü kağıtla örtün, ardından 37°C'de 30 dakika inkübe edin.

7. Tüm kuyucuklardaki sıvıyı atın ve kuyuları yıkama solüsyonu ile doldurun.15 saniye bekletin, tüm kuyucuklardaki sıvıyı boşaltın ve kuyuları yıkama solüsyonu ile doldurun.Son yıkamadan sonra 5 kez tekrarlayın ve kuyuları kurutun.

8. Kör hariç her kuyucuğa 50 µl konjugat HAV-Ag ekleyin.

9. Kör hariç her kuyuda Addμl 50 μl Enzim Konjugantı

10.Kuyucukları mühürlü kağıtla kapatın, ardından 37°C'de 30 dakika inkübe edin.

11. 7. adımı tekrarlayın.

12.Her kuyucuğa sırasıyla 50 µl substrat A ve B ekleyin, ışıktan koruyarak nazikçe karıştırın ve 37°C'de 15 dakika inkübe edin.

13. Kör kuyu da dahil olmak üzere reaksiyonu durdurmak için her kuyucuğa 50μl durdurma solüsyonu ekleyin.

14. Köre karşı 450 nm'de absorbansı ölçün veya 450 nm/630-690 nm'de absorbansı ölçün.