Tirotropin TSH ELISA TESTİ Tiroid Uyarıcı Hormon Testi

Sıcak Satış TSH ELISA TEST KİTİ
REF: DS177701 96 testleri

Kullanım amacı
İnsan serumunda tirotropinin in vitro kantitatif tayini için immünoanaliz.

1. Özet

• Tiroid uyarıcı hormon (TSH, tirotropin), yaklaşık moleküler ağırlığa sahip bir glikoproteindir.30000 dalton ve iki alt birimden oluşur.
• Serum konsantrasyonunun çoğu zaman ölçümü, moleküler ağırlığı 28.000 dalton olan ve ön hipofizden salgılanan bir glikoprotein olan tirotropin (TSH), genellikle birincil ve ikincil (hipofiz) hipotiroidizmin teşhisi için mevcut en hassas gösterge olarak kabul edilir (1, 2).
• TSH ölçümleri, ikincil ve üçüncül (hipotalamik) hipotiroidizmi birincil tiroid hastalığından ayırt etmede eşit derecede faydalıdır.Hipofizden TSH salınımı, hipotalamus tarafından salgılanan tirotropin salma faktörü (TRH) ve tiroid hormonları olan T4 ve triiyodotironin (T3)'ün hipofizde doğrudan etkisi ile düzenlenir.
• T3 ve T4 seviyelerinin artması, hipofizin TRH'nin uyarıcı etkilerine verdiği yanıtı azaltır.İkincil ve üçüncül hipotiroidizmde, T4 konsantrasyonları genellikle düşüktür ve TSH seviyeleri genellikle düşük veya normaldir.Buna ya hipofiz TSH eksikliği (sekonder hipotiroidizm) ya da hipofizin TRH tarafından uyarılmaması (üçüncül hipotiroidizm) neden olur.
• TRH stimülasyon testi bu koşulları ayırt eder.İkincil hipotiroidizmde, TRH'ye TSH yanıtı körelirken, üçüncül hipotiroidizmde normal veya gecikmiş bir yanıt elde edilir. Ayrıca, immünoenzimometrik testlerin ortaya çıkışı, laboratuvara, hipertiroidizmi ötiroid popülasyondan ayırt etmeyi ve bu TSH ölçümleri.Bu yöntem, hipertiroid-ötiroid aralığında ayrım için araçlar sağlayan ikinci nesil bir tahlildir.(3)

2. Reaktifler Sağlanan malzemeler
• Kaplı Mikroplaka, 8 x 12 şerit, 96 kuyu, fare monoklonal Anti-TSH ile önceden kaplanmış.
• Kalibratörler, 6 şişe, her biri 1 ml, kullanıma hazır;Konsantrasyonlar: 0(A), 0,5(B), 2(C), 5(D), 10(E) ve 25(F) μIU/mL.
• Enzim Eşleniği, 1 şişe, BSA (sığır serum albümini) içeren Tris-NaCl tamponu içinde 6.0 ml HRP (yaban turpu peroksidaz) etiketli fare monoklonal Anti-TSH.%0,1 ProClin300 koruyucu içerir.
• Substrat, 1 şişe, 11ml, kullanıma hazır, (tetrametilbenzidin) TMB.
• Stop Solution, 1 şişe, 6,0 ml 1 mol/l sülfürik asit.
• Yıkama Solüsyonu Konsantresi, 1 şişe, 25 ml (40X konsantre), PBS-Tween yıkama solüsyonu.
• Kullanım Talimatları, 1 kopya.
• Plaka Kapağı: 1 adet.

Gerekli malzemeler (ancak sağlanmadı)
• 450nm ve 620nm dalga boyunda emici özelliği olan mikroplaka okuyucu.
• Mikroplaka yıkayıcı.
• İnkübatör.
• Plaka çalkalayıcı.
• %1.5'ten daha iyi bir hassasiyetle 50μl sağlayan mikropipetler ve çok kanallı mikropipetler.
• Emici kağıt.
• Arıtılmış su

3. Test prosedürü

Ölçümden önce hasta numunelerinin, kalibratörlerinin ve kontrollerinin ortam sıcaklığında (18-25 ℃) olduğundan emin olun.Kullanmadan önce tüm reaktifleri hafifçe ters çevirerek karıştırın.

• Test edilecek her kalibratör ve numune için yalnızca gereken sayıda kuyu kullanın ve mikroplaka kuyularını biçimlendirin.• Her kuyucuğa 25 µL kalibratör veya numune ekleyin.

• Her kuyucuğa 100 µL enzim konjugatı ekleyin.

• Mikroplakayı karıştırmak için 30 saniye hafifçe sallayın.

• Plakayı bir plaka kapağı ile kapatın ve 37°C'de 60 dakika inkübe edin.

• Mikro plakanın içeriğini dekantasyon veya aspirasyon yoluyla atın.Boşaltma yapıyorsanız, plakaya hafifçe vurun ve emici kağıtla kurulayın.

• 350 µL yıkama solüsyonu ekleyin, boşaltın (dokun ve blot) veya aspire edin.Toplam 5 yıkama için 4 kez daha tekrarlayın.Otomatik bir mikroplaka şerit yıkayıcı kullanılabilir.Yıkamanın sonunda, plakayı ters çevirin ve kalan yıkama solüsyonunu emici kağıt üzerine hafifçe vurun.

• Her kuyucuğa 100 µL substrat ekleyin.

• Kapatın ve ortam sıcaklığında (18-25℃) karanlıkta reaksiyon için 20 dakika inkübe edin.Substate ilavesinden sonra plağı sallamayın.

• Her kuyucuğa 50 µL durdurma solüsyonu ekleyin.

• Kuyuların içindeki sıvının karışması için 15-20 saniye çalkalayın.Mavi rengin tamamen sarıya dönüşmesini sağlamak önemlidir.

• Her kuyunun absorbansını 450 nm'de (kuyu kusurlarını en aza indirmek için referans dalga boyu olarak 620 ila 630 nm kullanarak) bir mikro plaka okuyucuda okuyun.Sonuçlar, durdurma solüsyonu eklendikten sonraki 30 dakika içinde okunmalıdır.