ISO Tiroksin T4 Elisa Testi Ücretsiz T4 Serum Testi 110 Dakika Okuma Süresi

T4 Tiroksin
REF: DS177703 96 testleri

1. Kullanım amacı
İnsan serumunda tiroksinin in vitro kantitatif tayini için immünoanaliz.

2. Özet
Tiroksin hormonu (T4), tiroid bezi tarafından salgılanan ana üründür ve hipotalamus-ön hipofiz-tiroid düzenleyici sistemin ayrılmaz bir bileşenidir.Anabolik olarak metabolizmayı etkileme işlevine sahiptir.Tiroksin, tiroid bezinde iki DIT molekülünün (3,5-diiyodotirozin) birleşme reaksiyonunda oluşur.Tiroid foliküllerinin lümeninde tiroglobuline bağlı olarak depolanır ve gerektiğinde TSH'nin etkisi altında salgılanır.(1, 2) Serumdaki toplam tiroksinin (T4) büyük kısmı (> %99) proteine ​​bağlı formda bulunur.Serumdaki taşıyıcı proteinlerin konsantrasyonları eksojen ve endojen etkilere tabi olduğundan, serumdaki tiroid hormon konsantrasyonunun değerlendirilmesinde bağlayıcı proteinlerin durumu da dikkate alınmalıdır.Bu göz ardı edilirse, bağlayıcı proteinlerdeki değişiklikler (örn. östrojen içeren müstahzarlar nedeniyle, hamilelik sırasında veya nefrotik sendromun varlığında vb.) tiroid metabolik durumunun hatalı değerlendirilmesine yol açabilir.(3, 4, 5, 6, 7) T4'ün belirlenmesi şu endikasyonlar için kullanılabilir: hipertiroidizmin tespiti, birincil ve ikincil hipotiroidizmin tespiti ve TSH-bastırma tedavisinin izlenmesi.(8)
T4 tahlili, spesifik olarak T4'e yönelik bir antikor ile rekabetçi bir test prensibi kullanır.8-anilino-1-naftalin sülfonik asidin (ANS) etkisiyle salınan endojen T4.

3. Reaktifler Sağlanan malzemeler
• Kaplamalı Mikroplaka, 8 x 12 şerit, 96 kuyu, T4 türevi ile önceden kaplanmış.
• Kalibratörler, 6 şişe, her biri 1 ml, kullanıma hazır;Konsantrasyonlar: 0(A), 2.5(B), 5(C), 10(D), 15(E) ve 30(F) μg/dL.
• Enzim Konjugatı, 1 şişe, BSA (sığır serum albümini) içeren Tris-NaCl tamponu içinde 6.0 ml HRP (yaban turpu peroksidaz) etiketli fare monoklonal T4.%0.2 ProClin300 koruyucu içerir.ANS 1.5 mg/mL.
• Substrat, 1 şişe, 11ml, kullanıma hazır, (tetrametilbenzidin) TMB.
• Stop Solution, 1 şişe, 6,0 ml 1 mol/l sülfürik asit.
• Yıkama Solüsyonu Konsantresi, 1 şişe, 25 ml (40X konsantre), PBS-Tween yıkama solüsyonu.
• Kullanım Talimatları, 1 kopya.
• Plaka Kapağı: 1 adet.

4. Gerekli (ancak sağlanmayan) malzemeler
• 450nm ve 620nm dalga boyunda emici özelliği olan mikroplaka okuyucu.
• Mikroplaka yıkayıcı.
• İnkübatör.
• Plaka çalkalayıcı.
• %1.5'ten daha iyi bir hassasiyetle 50μl sağlayan mikropipetler ve çok kanallı mikropipetler.
• Emici kağıt.
• Arıtılmış su

Test prosedürü

Ölçümden önce hasta numunelerinin, kalibratörlerinin ve kontrollerinin ortam sıcaklığında (18-25 ℃) olduğundan emin olun.Kullanmadan önce tüm reaktifleri hafifçe ters çevirerek karıştırın.

• Test edilecek her kalibratör ve numune için yalnızca gereken sayıda kuyu kullanın ve mikroplaka kuyularını biçimlendirin.• Her kuyucuğa 50 µL kalibratör veya numune ekleyin.

• Her kuyucuğa 50 µL enzim konjugatı ekleyin.

• Mikroplakayı karıştırmak için 30 saniye hafifçe sallayın.

• Plakayı bir plaka kapağı ile kapatın ve 37 ℃'de 60 dakika inkübe edin.

• Mikro plakanın içeriğini dekantasyon veya aspirasyon yoluyla atın.Boşaltma yapıyorsanız, plakaya hafifçe vurun ve emici kağıtla kurulayın.

• 350 µl yıkama solüsyonu ekleyin, boşaltın (tap ve blot) veya aspire edin.Toplam 5 yıkama için 4 kez daha tekrarlayın.Otomatik bir mikroplaka şerit yıkayıcı kullanılabilir.Yıkamanın sonunda, plakayı ters çevirin ve kalan yıkama solüsyonunu emici kağıt üzerine hafifçe vurun.

• Her kuyucuğa 100 µL substrat ekleyin.

• Üzerini örtüp ortam sıcaklığında (18-25℃) karanlıkta reaksiyon için 20 dakika inkübe edin.Substate ilavesinden sonra plağı sallamayın.• Her kuyucuğa 50 µL durdurma solüsyonu ekleyin.

• Kuyuların içindeki sıvının karışması için 15-20 saniye çalkalayın.Mavi rengin tamamen sarıya dönüşmesini sağlamak önemlidir.

• Her kuyunun absorbansını 450 nm'de (kuyu kusurlarını en aza indirmek için referans dalga boyu olarak 620 ila 630 nm kullanarak) bir mikro plaka okuyucuda okuyun.Sonuçlar, durdurma solüsyonu eklendikten sonraki 30 dakika içinde okunmalıdır.