İnsan Trombomodulin TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kiti

Araştırma Amaçlı İnsan trombomodulin,TM,Fetomodulin,CD141,THBD,THRM ELISA Kiti

İnsan trombomodulin,TM,Fetomodulin,CD141,THBD,THRM ELISA Kiti

Kitle birlikte verilen malzemeler

Prensip

Bu ELISA kiti, yöntem olarak Sandwich-ELISA'yı kullanır.Bu kitte sağlanan Microelisa şerit plakası, trombomodulin'e özgü bir antikorla önceden kaplanmıştır.Standartlar veya numuneler uygun Microelisa stripplate kuyularına eklenir ve spesifik antikorla birleştirilir.Daha sonra trombomodulin için spesifik Horseradish Peroxidase (HRP)-konjuge antikoru her Microelisa stripplaka kuyusuna eklenir ve inkübe edilir.Serbest bileşenler yıkanır.TMB substrat solüsyonu her kuyuya eklenir.Yalnızca trombomodulin ve HRP konjuge trombomodulin antikoru içeren kuyucuklar mavi renkte görünecek ve durdurma solüsyonunun eklenmesinden sonra sarıya dönecektir.Optik yoğunluk (OD), 450 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür.OD değeri, trombomodulin konsantrasyonu ile orantılıdır.Örneklerin OD'sini standart eğriyle karşılaştırarak örneklerdeki trombomodulin konsantrasyonunu hesaplayabilirsiniz.

örnek hazırlama

1.serum hazırlama

Tam kan alındıktan sonra, oda sıcaklığında bozulmadan bırakarak kanın pıhtılaşmasını sağlayın.Bu genellikle 10-20 dakika sürer.20 dakika 2.000-3.000 rpm'de santrifüjleyerek pıhtıyı çıkarın.Rezervasyon sırasında çökeltiler ortaya çıkarsa, numune tekrar santrifüjlenmelidir.

2.Plazma hazırlığı

Tam kanı antikoagülanlı (EDTA veya sitrat) tüplere alın.Oda sıcaklığında 10-20 dakika inkübe edildikten sonra tüpler 2000-3000 rpm'de 20 dakika santrifüj edilir.Süpernatantı plazma örnekleri olarak dikkatlice toplayın.Rezervasyon sırasında çökeltiler ortaya çıkarsa, numune tekrar santrifüjlenmelidir.

3.idrar örnekleri

İdrarı aseptik tüplere toplayın.2.000-3.000 rpm'de 20 dakika santrifüj edildikten sonra süpernatantı dikkatlice toplayın.Rezervasyon sırasında çökeltiler ortaya çıkarsa, numune tekrar santrifüjlenmelidir.Beyin omurilik sıvısı ve plöroperitoneal sıvının hazırlanma prosedürü idrar örneğininki ile aynıdır.

4.hücre örnekleri

Hücrelerin salgılarını saptamak istiyorsanız, kültür süpernatantını aseptik tüplere toplayın.2.000-3.000 rpm'de 20 dakika santrifüj edildikten sonra süpernatantı dikkatlice toplayın.Hücre içi bileşenleri tespit etmek istiyorsanız, hücreleri 1X10'a seyreltin.⁶/ml ile PBS (pH 7.2-7.4).Hücreler, tekrar tekrar dondurma ve çözme yoluyla hücre içi bileşenleri serbest bırakmak için yok edildi.2.000-3.000 rpm'de 20 dakika santrifüj edildikten sonra süpernatantı dikkatlice toplayın.Rezervasyon sırasında çökeltiler ortaya çıkarsa, numune tekrar santrifüjlenmelidir.

5.Doku örnekleri

Doku örnekleri kesilir, tartılır, sıvı nitrojen içinde dondurulur ve ileride kullanılmak üzere -80°C'de saklanır.Doku örnekleri PBS (pH 7.4) eklendikten sonra homojenize edildi.Numuneler 4℃'de çalıştırılmalıdır.2.000-3.000 rpm'de 20 dakika santrifüj edildikten sonra süpernatantı dikkatlice toplayın.ELISA testi ve gelecekteki kullanım için süpernatantı bölün.

Notlar:

• Numune alımı ve ELISA testi, numune alımından sonra mümkün olan en kısa sürede yapılmalıdır.Numuneler ilgili literatüre göre çıkarılmalıdır.ELISA testi hemen gerçekleştirilemezse, numuneler -20°C'de saklanabilir. Tekrarlanan donma-çözülme döngülerinden kaçınılmalıdır.
• Kitlerimiz, HRP aktivitesini engelleyebilecek NaN3 içeren numuneler için kullanılamaz.