Sandviç Elisa VD3 RUO Test Kiti Araştırma Kullanımı İçin Vitamin D3 Elisa Kiti

İnsan Vitamin D3;VD3 ELISA Kiti

• Son kullanma tarihi: altı ay.
• Depolama: 2-8 ℃.
• İnsan Vitamin D3 (VD3) ELISA kitimiz, İnsan serumu, plazma, kültür ortamı veya herhangi bir biyolojik sıvıdaki Vitamin D3 (VD3) seviyelerini test etmektir.

Prensip

  Bu ELISA kiti, yöntem olarak Sandwich-ELISA'yı kullanır.Bu kitte sağlanan Microelisa şerit plakası, Vitamin D3'e (VD3) özgü bir antikorla önceden kaplanmıştır.Standartlar veya numuneler uygun Microelisa stripplate kuyularına eklenir ve spesifik antikorla birleştirilir.Daha sonra Vitamin D3'e (VD3) özgü bir Horseradish Peroxidase (HRP)- konjuge antikoru her Microelisa stripplate kuyusuna eklenir ve inkübe edilir.Serbest bileşenler yıkanır.TMB substrat solüsyonu her kuyuya eklenir.Yalnızca Vitamin D3 (VD3) ve HRP konjuge Vitamin D3 (VD3) antikoru içeren kuyucuklar mavi renkte görünecek ve durdurma solüsyonunun eklenmesinden sonra sarıya dönecektir.Optik yoğunluk (OD), 450 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür.OD değeri Vitamin D3 (VD3) konsantrasyonu ile orantılıdır.Örneklerin OD'sini standart eğriyle karşılaştırarak örneklerdeki Vitamin D3 (VD3) konsantrasyonunu hesaplayabilirsiniz.

Kitle birlikte verilen malzemeler

• Standartların Seyreltilmesi

Bir Microelisa şerit plakasında standartlar için on kuyu ayarlanmıştır.Kuyu 1 ve Kuyu 2'de 100μl Standart solüsyon ve 50μl Standart Seyreltme tamponu eklenir ve iyice karıştırılır.Kuyu 3 ve Kuyu 4'te, sırasıyla Kuyu 1 ve Kuyu 2'den 100 ul solüsyon eklenir.Daha sonra 50μl Standart Seyreltme tamponu eklenir ve iyice karıştırılır.Kuyu 3 ve Kuyu 4'ten 50μl solüsyon atılır. Kuyu 5 ve Kuyu 6'da sırasıyla Kuyu 3 ve Kuyu 4'ten 50μl solüsyon eklenir.Daha sonra 50μl Standart Seyreltme tamponu eklenir ve iyice karıştırılır.Kuyu 7 ve Kuyu 8'de, sırasıyla Kuyu 5 ve Kuyu 6'dan 50 ul solüsyon eklenir.Daha sonra 50μl Standart Seyreltme tamponu eklenir ve iyice karıştırılır.Kuyu 9 ve Kuyu 10'da, sırasıyla Kuyu 7 ve Kuyu 8'den 50 ul solüsyon eklenir.Daha sonra 50μl Standart Seyreltme tamponu eklenir ve iyice karıştırılır.50μl solüsyon Kuyu 9 ve Kuyu 10'dan atılır. Seyreltmeden sonra, tüm kuyulardaki toplam hacim 50μl'dir ve konsantrasyonlar 30 ng/ml, 20 ng/ml, 10 ng/ml, 5 ng/ml ve 2.5 ng/'dir. sırasıyla ml.

Sonuçların Hesaplanması

İnsan Vitamin D3 (VD3) Standardının bilinen konsantrasyonları ve buna karşılık gelen OD okuması, sırasıyla log ölçeğinde (x ekseni) ve log ölçeğinde (y ekseni) çizilir.Numunedeki İnsan Vitamin D3 (VD3) konsantrasyonu, numunenin OD'si Y ekseni üzerinde çizilerek belirlenir.Orijinal konsantrasyon, seyreltme faktörü çarpılarak hesaplanır.

Kesinlik

Test İçi Kesinlik (Test içinde kesinlik): Düşük, orta ve yüksek düzeyde İnsan Vitamini D3 (VD3) içeren 3 numune sırasıyla bir plaka üzerinde 20 kez test edilmiştir.

Testler Arası Kesinlik (Testler arası kesinlik): Düşük, orta ve yüksek düzeyde İnsan Vitamini D3 (VD3) içeren 3 numune, her plakada 8 tekrar olmak üzere 3 farklı plaka üzerinde test edilmiştir.

CV(%) = SD/ortalamaX100

Test İçi: CV<%10

Testler Arası: CV<12%

Test aralığı

0,8 ng/ml -36 ng/ml

Duyarlılık:

0,3 ng/ml

• Kiti teslim aldıktan sonra 4°C'de saklayın. Kit, testten önce oda sıcaklığına dengelenmelidir.İnsan Vitamini D3 (VD3) Antikor Kaplı plakadan gereksiz tüm şeritleri çıkarın, bunları kilitli folyoya tekrar kapatın ve 4°C'de saklayın.
• Standart eğri her teste dahil edilmelidir.Çoğaltma kuyuları önerilir.Numunenin OD değeri standartların ilk kuyusundan büyükse, lütfen testten önce numuneyi (n kez) seyreltin.Orijinal Vitamin D3 (VD3) konsantrasyonunu hesaplarken lütfen toplam seyreltme faktörünü (XnX5) çarpın.