Interlökin-2 Reseptör Alt Birimi Alfa Fare IL2R CD25 IL2-RA ELISA Kiti

Fare İnterlökin-2 reseptör alt birimi alfa;IL2R;CD25;IL2-RA ELISA kiti

Kitle birlikte verilen malzemeler

Numune gereksinimleri

• serum-oda sıcaklığında 10-20 dakika pıhtılaşma, 2000-3000 rpm hızında 20 dakika santrifüjleme süpernatantı uzaklaştırın, Eğer çökelme meydana gelirse, tekrar Santrifüjleyin.
• plazma-Antikoagülan olarak uygun EDTA veya sitrat plazma kullanın, 10-20 dakika karıştırın, 2000-3000 rpm hızında 20 dakika santrifüjleyin, süpernatantı çıkarın, Çökelme meydana gelirse, tekrar Santrifüjleyin.
• İdrar-Steril bir kapta toplayın, 2000-3000 rpm hızında 20 dakika santrifüjleyin, süpernatantı çıkarın, Çökelti meydana gelirse, tekrar Santrifüjleyin.Hidrotoraks ve beyin omurilik sıvısının Çalışması
• hücre kültürü süpernatanı- salgı bileşenlerini tespit edin, steril bir kap toplayın, 2000-3000 rpm hızında 20 dakika santrifüjleyin, süpernatantı çıkarın, hücrelerin bileşimini tespit edin, Hücre süspansiyonunu PBS (PH7.2-7.4) ile seyreltin, Hücre konsantrasyonu 1 milyona ulaştı / ml, tekrarlanan donma-çözülme döngüleri, hücrelere zarar verir ve hücre içi bileşenlerin salınması, 2000-3000 rpm hızında 20 dakika santrifüjleme, süpernatantı uzaklaştırır, Eğer çökelme görülürse, tekrar Santrifüjleyin.
• Doku örnekleri- Numuneleri kestikten sonra, ağırlığı kontrol edin, PBS(PH7.2-7.4) ekleyin, sıvı nitrojen ile hızla dondurun, numuneleri erittikten sonra 2-8°C'de tutun, PBS(PH7.4) ekleyin, Elle veya Öğütücüler ile homojenize edin, santrifüjleyin 2000-3000 rpm hızında 20 dakika süpernatantı uzaklaştırın.
• Numune alındıktan sonra mümkün olan en kısa sürede ve ilgili literatüre göre ekstrakte edilmeli ve ekstraksiyondan sonra mümkün olan en kısa sürede deney yapılmalıdır.Olmazsa, numune korumak için -20 ℃'de tutulabilir, Tekrarlanan donma-çözülme döngülerinden kaçının.
• NaN3 içeren numune tespit edilemiyor çünkü NaN3, HRP aktifini inhibe ediyor.

Prensip

Bu ELISA kiti, yöntem olarak Sandwich-ELISA'yı kullanır.Bu kitte sağlanan Microelisa şerit plakası, spesifik bir antikorla önceden kaplanmıştır.IL2R.Standartlar veya numuneler uygun Microelisa stripplate kuyularına eklenir ve spesifik antikorla birleştirilir.Sonra bir Horseradish Peroxidase (HRP) - spesifik konjuge antikorIL2Rher Microelisa stripplaka kuyusuna eklenir ve inkübe edilir.Serbest bileşenler yıkanır.TMB substrat solüsyonu her kuyuya eklenir.Sadece içeren kuyularIL2Rve HRP konjuge trombomodulin antikoru mavi renkte görünecek ve durdurma solüsyonunun eklenmesinden sonra sarıya dönecektir.Optik yoğunluk (OD), 450 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçülür.OD değeri, konsantrasyonu ile orantılıdır.IL2R.konsantrasyonunu hesaplayabilirsiniz.IL2Rnumunelerin OD'sini standart eğriyle karşılaştırarak numunelerde.

Notlar:

• Kiti teslim aldıktan sonra 4°C'de saklayın. Kit, testten önce oda sıcaklığına dengelenmelidir.IL2R Antikor Kaplamalı plakadan gereksiz tüm şeritleri çıkarın, bunları kilitli folyo ile yeniden kapatın ve 4°C'de saklayın.
• Konsantre yıkama tamponunda çökeltiler görünebilir.Sonuçları etkilemeyecek olan tüm çökeltileri çözmek için lütfen tamponu ısıtın.
• Deneysel hatayı önlemek için doğru pipet kullanılmalıdır.Örnekler Mikroplaka 5 dakikadan daha kısa sürede eklenmelidir.Çok sayıda numune dahil edilmişse, çok kanallı pipet önerilir.
• Standart eğri her teste dahil edilmelidir.Çoğaltma kuyuları önerilir.Numunenin OD değeri standartların ilk kuyusundan büyükse, lütfen testten önce numuneyi (n kez) seyreltin.Orijinal trombomodulin konsantrasyonunu hesaplarken, lütfen toplam seyreltme faktörünü (XnX5) çarpın.
• Çapraz kontaminasyonu önlemek için Mikroplaka kapatıcılar yalnızca bir defalık kullanım içindir.
• Lütfen Substratı ışıktan uzak tutun.
• Tüm işlemler kesinlikle üreticinin talimatlarına uygun olmalıdır.Mikrotiter Plaka Okuyucu tarafından belirlenen sonuçlar.
• Tüm numuneler, yıkama tamponu ve atıklar enfeksiyöz ajanlar olarak ele alınmalıdır.
• Farklı lotlardan reaktifler karıştırılmamalıdır.