İnsan Irisin ELISA Test KIT

Amaçlı Kullanım

Bu kit, insan serumunda, plazmasında ve diğer biyolojik sıvılarda Irisin konsantrasyonlarının belirlenmesini sağlar.

Denetim prosedürü

1. Örneği seyrelt ve ekle:Seyrelt Asıl yoğunluk Standartı aşağıdaki tabloda:

2Örnek ekleyin: Boş kuyulara ayrı ayrı yerleştirin (boş karşılaştırma kuyulara örnek ve HRP-Conjugate rejansi eklenmez, diğer her adım işlem aynıdır). test örneği kuyusu.50μl standartı Microelisa stripplate'a ekleyin.Test örneği kuyusuna 40μl örnek seyreltilmesi ekleyin, daha sonra test örneği 10μl ekleyin (örnek son seyreltilmesi 5 kattır), örneği kuyulara ekleyin, mümkün olduğunca kuyunun duvarına dokunmayın ve dikkatlice karıştırın.

3Inkubasyon: Kapalı plaka zarıyla kapattıktan sonra, 37°C'de 30 dakika inkubasyon yapılır.

4.Sıvı yapılandır: 30 (veya 20) katlı yıkama çözeltisi, 30 (veya 20) katlı damıtılmış su ve rezerv ile seyreltilmiştir.

5Yıkama:Kapatma plaka zarını, atın sıvı, sallayarak kurut, her kuyunun yıkama tamponunu ekleyin, 30 saniye kalın sonra boşaltın, 5 kez tekrarlayın, patlayarak kurut.

6.enzim ekleyin:HRP-Konjügat Reagent 50μl'i boş kuyudan başka her kuyuya ekleyin.

7İnkubatör: 3 ile çalış.

8Yıkama: 5 ile çalıştırılır.

9.color:Her kuyunun içine Chromogen Solution A 50ul ve Chromogen Solution B 50ul ekleyin, 37°C'de 10 dakika ışık korumasından kaçının.

10Reaksiyonu durdurun:Her kuyunun içine Stop Solution50μl ekleyin, Reaksiyonu durdurun ((mavi renk sarıya değişir).

11Test: sıfır değerinde boş çukur alınır, 450nm'de emilim ölçülür ve 15 dakika içinde çözeltinin durdurulmasını sağlar.

Örnek şartları

1Örnek toplandıktan sonra mümkün olan en kısa sürede ve ilgili literatüre göre çıkarılmalı ve çıkarıldıktan sonra mümkün olan en kısa sürede deney yapılmalıdır.numune -20 °C'de muhafaza edilebilir.Tekrarlanan dondurma- çözme döngülerinden kaçının.

2"NaN3 içeren numuneyi tespit edemiyorum çünkü NaN3 HRP aktifini inhibe ediyor.

3Örnek toplandıktan sonra mümkün olan en kısa sürede ve ilgili literatüre göre çıkarılmalı ve çıkarıldıktan sonra mümkün olan en kısa sürede deney yapılmalıdır.numune -20 °C'de muhafaza edilebilir.Tekrarlanan dondurma- çözme döngülerinden kaçının.

4NaN3 içeren numuneyi tespit edemiyoruz çünkü NaN3 HRP aktifini inhibe ediyor.

Önemli notlar

• Kit, soğutma ortamından çıkarılır, oda sıcaklığında 15-30 dakika dengelenmelidir, ELISA plakaları açıldıktan sonra kullanılmazsa kaplanmıştır.Plaka mühürlü torbada saklanmalıdır..
• Yıkama tamponu kristalleşme ayrımı yapar, ısıtıldığında suyun çözülmesine yardımcı olur.
• Her adımda örnekle örnekleyici ile örnek ekleyin ve sık sık doğruluğunu düzeltin, deneysel hatadan kaçının. 5 dakika içinde örnek ekleyin, eğer örnek sayısı çok ise Volley kullanmanızı öneririz.
• Eğer test malzemesinin içeriği aşırı derecede yüksekse (Örnek OD'si ilk standart kuyudan daha büyükse ), Lütfen örneği seyreltin (n kat), Lütfen seyreltin ve seyreltme faktörüne çarpın.(×n×5).
• Kapama plaka zarı, çapraz kirlenmeyi önlemek için tek kullanım kullanımını sınırlıyor.
• Alt katman ışık korumasından kaçıyor..
• Lütfen kullanım talimatlarına sıkı sıkıya uyun. Test sonuçlarının belirlenmesi için mikrotiter plakası okuyucuyu standart olarak kullanmalısınız.
• Tüm numuneler, yıkama tamponu ve her türlü atık enfeksiyon madde işlemine göre yapılmalıdır.
• Reaktörleri diğer partilerden olanlarla karıştırmayın.