İnsan TNF-α Elisa Test Kits

Amaçlı Kullanım

Bu kit, insan hücre kültürü süpernatlarında TNF-α konsantrasyonlarının belirlenmesi için kullanılır.

Denetim prosedürü

1- Sıvılat ve örnek ekle:Sıvılat Asıl yoğunluk Standart aşağıdaki tabloda: 400ng/L 5 Standard 150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 200ng/L 4 Standard 150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 100ng/L 3 Standard 150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 50ng/L 2 Standard 150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 25ng/L 1 Standard 150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2Örnek ekleyin: Boş çukurları ayrı ayrı yerleştirin (boş karşılaştırma çukurları örnek ve HRP-Conjugate rejans eklemez, diğer her aşama işlem aynıdır).50μl standartı Microelisa stripplate'a ekleyin.Test örneğine 40μl örnek seyreltilmesi ekleyin, daha sonra test örneği 10μl ekleyin (örnek son seyreltilmesi 5 kat), örneği örneğe ekleyin, mümkün olduğunca yüzeye dokunmayın ve dikkatlice karıştırın.

3Inkubasyon: Kapalı plaka zarıyla kapattıktan sonra, 37°C'de 30 dakika inkubasyon yapılır.

4.Sıvıyı yapılandırın: 30 (veya 20) katı yıkama çözeltisi, 30 (veya 20) katı distiled su ve rezervi ile seyreltilmiştir.

5Yıkama: Kapama plaka zarını aç, sıvıyı at, sallayarak kurut, her kuyuya yıkama tamponu ekle, 30 saniye kal sonra boşalt, 5 kez tekrarla, patlayarak kurut.

6Enzim ekleyin:Blank well hariç her bir çanağa 50μl HRP-konjugat rejansi ekleyin.

7İnkubatör: 3 ile çalış.

8Yıkama: 5 ile çalıştırılır.

9.color:Her çanağa Chromogen Solution A 50ul ve Chromogen Solution B 50ul ekleyin, 37°C'de 10 dakika ışık korumasından kaçının.

10Reaksiyonu durdurun: Her bir alana Stop Solution50μl ekleyin, Reaksiyonu durdurun ((mavi renk sarıya değişir).

11Test: sıfır değerinde sıfır alınır, 450nm'de emilim ölçülür.

Örnek şartları

1Örnek toplandıktan sonra mümkün olan en kısa sürede ve ilgili literatüre göre çıkarılmalı ve çıkarıldıktan sonra mümkün olan en kısa sürede deney yapılmalıdır.1 numune korunmak için 20 °C'de tutulabilir.Tekrarlanan dondurma- çözme döngülerinden kaçının.

2NaN3 içeren numuneyi tespit edemiyoruz çünkü NaN3 HRP aktifini inhibe ediyor.

Önemli notlar

1. Kit soğutma ortamından çıkarılır, oda sıcaklığında 15-30 dakika dengelenmelidir, ELISA plakaları açıldıktan sonra kullanılmazsa kaplanmıştır.Plaka mühürlü torbada saklanmalıdır..

2. yıkama tamponu will kristalleşme ayrımı, ısıtılabilir suyun seyreltildiğinde çözülmesine yardımcı olur. yıkama sonucu etkilemez.

3. örnekleme cihazı ile örnekle her adımda ekleyin ve sık sık doğruluğunu düzeltin, deneysel hatadan kaçının. 5 dakika içinde örnekle ekleyin, eğer örnek sayısı çok ise, Voley kullanmanızı öneririz.

4Eğer test malzemesinin içeriği aşırı derecede yüksekse (Numune OD'si ilk standart değerden daha büyükse), lütfen numuneyi seyreltin (n kat), lütfen seyreltin ve seyreltme faktörüne çarpın.(×n×5).

5Kapama plaka zarı sadece çapraz kirlenmeyi önlemek için tek kullanım kullanımını sınırlamaktadır.

6Substrat ışık korumasından kaçıyor.

7Lütfen kullanım talimatlarına sıkı bir şekilde uyun, test sonuçlarının belirlenmesi için mikrotiter plaka okuyucuyu standart olarak almalısınız.

8Al örnekler, yıkama tamponu ve her türden atık enfeksiyon madde süreci göre olmalıdır.

9Diğer partilerden alınan rejanlarla karıştırmayın.