Testin prensibi
Bu kit, sıçan serumunda, hücre kültürü süpernatlarında ve diğer biyolojik sıvılarda P53 konsantrasyonlarının belirlenmesini sağlar.
Örnekte insan CD16 seviyesini ölçmek için kit kullanın. Temiz insan CD16 antikorunu kullanın. Mikrotiter plakaları kaplayıp katı fazlı antikor yapın.HRP etiketlenmiş kombinasyon CD16 antikoru, antikor-antijen-enzim-antikor kompleksi haline gelir, yıkadıktan sonra Tamamen, TMB alt döşeme çözeltisi ekleyin, TMB alt döşeme HRP enzim katalize mavi renk olur,reaksiyon kükürt asidi çözeltisi eklenerek sona erdirilir ve renk değişikliği 450 nm dalga boyunda spektrophotometrically ölçülürDaha sonra örneklerdeki insan CD16 konsantrasyonu, örneklerin O.D.'sini standart eğriyle karşılaştırarak belirlenir.
K ile sağlanan malzemeler- Evet.
| 1 |
yıkama çözeltisi |
20 ml × 1 şişe |
7 |
Çözümü Durdurun |
6ml×1 şişe |
| 2 |
HRP-konjugat reaktif |
6ml×1 şişe |
8 |
Standart ((20μg/L) |
0.5ml×1 şişe |
| 3 |
Microelisa striplatası |
12 iyi × 8 şerit |
9 |
Standart seyrelticiler |
1.5ml×1 şişe |
| 4 |
Örnek seyrelticisi |
6ml×1 şişe |
10 |
Eğitim |
1 |
| 5 |
Kromojen çözeltisi A |
6ml×1 şişe |
11 |
Kapama plaka zarı |
2 |
| 6 |
Kromojen Solüsyonu B |
6ml×1 şişe |
12 |
Kapalı torbalar |
1 |
Örnek şartları
- Örnek toplandıktan sonra mümkün olan en kısa sürede ve ilgili literatüre göre çıkarılmalı ve çıkarıldıktan sonra mümkün olan en kısa sürede deney yapılmalıdır.numune -20 °C'de muhafaza edilebilir.Tekrarlanan dondurma- çözme döngülerinden kaçının.
- NaN3 içeren numuneyi tespit edemiyorum çünkü NaN3 HRP aktifini inhibe ediyor.
Denetim prosedürü
- Sıvılat ve numune ekle:Sıvılat Asıl yoğunluk Standartı aşağıdaki tablo gibi:
| 10μg/l |
5 Standart |
150μl Orijinal yoğunluk Standart + 150μl Standart seyrelticiler |
| 5μg/l |
4 Standart |
150μl 5 Standart + 150μl Standart seyrelticiler |
| 2.5 μg/l |
3 Standart |
150μl 4 Standart + 150μl Standart seyrelticiler |
| 1.25 μg/l |
2 Standart |
150μl 3 Standart + 150μl Standart seyrelticiler |
| 0.625μg/l |
1 Standart |
150μl 2 Standart + 150μl Standart seyrelticiler |
2Örnek ekleyin: Boş kuyulara ayrı ayrı yerleştirin (boş karşılaştırma kuyulara örnek ve HRP-Conjugate rejansi eklenmez, diğer her adım işlem aynıdır). test örneği kuyusu.50μl standartı Microelisa stripplate'a ekleyin., test örneği kuyusuna 40μl örnek seyreltilmesi ekleyin, daha sonra test örneği 10μl ekleyin (örnek son seyreltilmesi 5 kattır), kuyulara örnek ekleyin, mümkün olduğunca kuyunun duvarına dokunmayın ve dikkatlice karıştırın.
3Inkubasyon: Kapalı plaka zarıyla kapattıktan sonra, 37°C'de 30 dakika inkubasyon yapılır.
4.Sıvı yapılandır: 30 (veya 20) katlı yıkama çözeltisi, 30 (veya 20) katlı damıtılmış su ve rezerv ile seyreltilmiştir.
5Yıkama:Kapatma plaka zarını, atın sıvı, sallayarak kurut, her kuyuya yıkama tamponu ekleyin, 30 saniye kalın sonra boşaltın, 5 kez tekrarlayın, patlayarak kurut.
6.enzim ekleyin:HRP-Konjügat Reagent 50μl, boş kuyunun haricinde her kuyunun içine eklenir.
7İnkubatör: 3 ile çalış.
8Yıkama: 5 ile çalıştırılır.
9.color:Her kuyunun içine Chromogen Solution A 50ul ve Chromogen Solution B 50ul ekleyin, 37°C'de 15 dakikalığına ışık korumasından kaçının.
10Reaksiyonu durdurun:Her kuyunun içine Stop Solution50μl ekleyin, Reaksiyonu durdurun ((mavi renk sarıya değişir).
11Test: sıfır değerinde boş çukur alınır, 450nm'de emilim ölçülür ve 15 dakika içinde çözeltinin durdurulmasını sağlar.
Mesajınız 20-3.000 karakter arasında olmalıdır!
