Hepatit B Virüsü Temel Antijenine (HBcAb) karşı antikor

ELISA TBuK- Evet.

Sadece in vitro teşhis ve profesyonel kullanım için.

Ürün Adı

Anti-HBc ELISA Test Kütesi (Serum/Plazma)

Amaçlı Kullanım

Bu anti-HBc ELISA Test Kütesi, insan serum/plazmasında hepatit B virüsü çekirdek antijenine (HBcAb) karşı antikorların kalitatif olarak tespit edilmesidir.Reagans, insan serum/plazmalarında hepatit B virüsü enfeksiyonunun klinik taraması ve teşhisi için uygundur..

Sınav prensibi

Hepatit B virüsü (HBV) bir zarftır.Hepadnaviridae ailesine ait ve hepatit C virüsü (HCV) ile birlikte kanla bulaşan hepatitin başlıca nedeni olarak kabul edilen çift zincirli DNA virüsü. HBV enfeksiyonu hafif, belirgin olmayan hastalıktan, şiddetli kronik karaciğer hastalığına,Bazı durumlarda karaciğer sirrozuna ve karsinoumuna yol açabilirHepatit B enfeksiyonunun sınıflandırılması, enfeksiyonun üç aşamasında (inkübasyon, akut ve iyileşme) ifade edilen birkaç serolojik belirtecinin belirlenmesini gerektirir.

Virüsün ana bileşeni Hepatit B çekirdek antijenidir (HBcAg).Bu çekirdek antijen, çekirdek parçacıklarının parçalanmasında boşaltılan yaklaşık 17kD'lik tek bir polipeptitten oluşur.Antijende en az bir bağışıklık belirleyicisi bulunur.

HBsAg' in ortaya çıkmasından kısa bir süre sonra, HBcAg' e karşı antikorlar (anti-HBc toplam antikor ve IgM) ortaya çıkar ve asla kaybolmaz.a Hepatit B enfeksiyonu bağışıklık açısından tespit edilebilir anti-HBc olmadan bulaşabilirBu, genellikle bağışıklık sistemi altüst hastalarda bulunur. Anti-HBc taraması, çeşitli popülasyonlarda hepatit B'nin yaygınlığı hakkında veriler verir.kronik, veya HBV enfeksiyonu çözülmüştür.anti-HBc belirteci doğru teşhisi ve virüs ilerlemesinin uygun bir şekilde izlenmesini sağlar.Anti-HBc, hepatit B enfeksiyonunun tek göstergesi olabilir (HBsAg- negatif hastaların diğer testleri de dahil).

HBcAb ELISA testinin sistemi katı faz, tek aşamalı kuluçka rekabetçi ilkesine dayanmaktadır.Monoklonal anti-HBc ile rekabet eder ve mikroplatta önceden kaplanmış sabit miktarda saflaştırılmış HBcAg için mercimek peroksidazına (HRP-Conjugate) konjuge edilir.. Eğer anti-HBc bulunmuyorsa, HRP-konjugasyonlu anti-HBc kuyuların içindeki antijenlerle bir araya gelir. Yıkama sırasında, bağlı olmayan herhangi bir HRP-konjugat çıkarılır.Kromojen çözeltileri A ve B kuyulara eklendikten sonra ve inkubasyon sırasında, mavi renkli bir ürün ortaya çıkar. Sülfürik asitle reaksiyon durdurulduktan sonra mavi renk sarıya döner. Örnekte HBcAg'ye karşı antikorların varlığı düşük renk ile belirtilir,veya hiç renk yok..

Örnek şartları

1.Örnek toplama:Özel bir hasta hazırlığı gerekmez. Normal laboratuvar uygulamasına uygun olarak numune alınır. Bu test için taze serum/plazma numuneleri kullanılabilir.Venopuntür yoluyla toplanan kanın doğal ve tamamen pıhtılaşmasına izin verilmelidir Serum kan pıhtısından mümkün olduğunca erken ayrılmalıdır, böylece kırmızı kan pıhtılaşması önlenir.Serum/plazma numunelerinin temiz ve mikroorganizmalarla kirlenmemiş olmasını sağlamak için dikkat edilmelidir.

2.HLipeemik, ikterik veya hemolitik örnekler kullanılamaz. kullanılmışÇünkü testte yanlış sonuç verebilirler.Sıcaklığı kapatmayın. ÖrneklerBu, hedef analitin bozulmasına neden olabilir. Görünen mikrobiyal kontaminasyona sahip örnekler asla kullanılmamalıdır.

3. HBcAb ELISA sadece bireysel serum/plazma örneklerinin test edilmesi için tasarlanmıştır. Testin ceset örneklerinin, tükürük, idrar veya diğer vücut sıvılarının veya toplanmış (karışık) kanın test edilmesi için kullanılmaması gerekir.

4Taşıma ve Depolama: Örnekleri 2-8°C'de saklayın. 3 gün içinde test için gerekli olmayan örnekler dondurulmuş (-20°C veya daha düşük) olarak saklanmalıdır.Nakliye için, numuneler klinik numunelerin ve etolojik ajanların taşınması için mevcut yerel ve uluslararası düzenlemelere uygun olarak paketlenmeli ve etiketlenmelidir.

Test Prosedürü

1Kullanımdan önce tüm reaktiflerin oda sıcaklığına 15 dakika kadar gelmesine izin verilmelidir.

2Yıkama tamponunu kullanmadan önce 1:40 oranında damıtılmış su ile seyreltin.

3Örnek, mikro plaka sayısına karşılık gelmelidir, her plaka 3 negatif kontrol kuyusu, 2 pozitif kontrol kuyusu ve 1 boş kontrol kuyusu ile donatılmalıdır.(İki dalga boyu algısı ile algılanırsa, boş kontrol kuyusu ayarlanmasına izin verilmemektedir).

Not: Çapraz kirlenmeyi önlemek için, her numune, negatif ve pozitif kontrol için ayrı bir atma pipet ucu kullanın.

450μL numuneyi ilgili kuyuya ekleyin (Bu kit klinik yardımcı teşhis için kullanıldığında, test edilecek numune test için 1:30'da normal tuzlu su ile seyreltilmelidir.Epidemiyolojik araştırmalar için kullanıldığında, orijinal numune tespit edilebilir ), negatif kontrol kuyularına ve pozitif kontrol kuyularına 50μL negatif kontrol ve pozitif kontrol eklenir.Enzim Konjugatı 50μL'nin eklenmesi (boş kuyunun içine eklenmez).

5. Bir osilatörle 30 saniye sallayın (Bu adım çok önemlidir). 37 °C'de 30 dakika inkubasyon yapın ve mühürleme plaka zarı plakanı mühürler.

6. İnkubasyonun sonunda, plaka kapağını çıkarın ve atın. Çıkarın, her kuyunun içine 20 saniye boyunca yıkama tamponu ekleyin. 5 kez tekrarlayın. Son yıkama döngüsünden sonra, bu işlem tamamlanır.Tabakayı temiz kağıt veya havlu üzerine çevirin., ve kalıntıları kaldırmak için dokunun.

7. Substrate A (50μL) ve Substrate B (50μL) ekleyin (boş kuyunun içine eklemeyin). Sallayarak hafifçe karıştırın. 37 °C'de 15 dakika inkubasyon yapın.

8. Her kuyuya 50μL Stop Solüsyon ekleyin (boş kuyuya eklemeyin). Sallayarak hafifçe karıştırın, reaksiyonu durdurduktan sonra 10 dakika içinde emilim ölçün.Blank iyi ile plak okuyucu kalibre ve 450nm'de emici okumak.Çifte filtreli bir enstrüman kullanılırsa, referans dalga boyunu 630nm'ye ayarlayın. Çifte dalga boyunu algılamak için kullanılırsa boş kuyuların ayarlanmasına izin verilmez. Kesme değerini hesaplayın ve sonuçları değerlendirin.