Ürün Adı

HDV (Hepatit D Virüsü) Gerçek Zamanlı RT-PCR Tespit Kiti

Kullanım Amacı

İçin in vitro HDV RNA'sının kalitatif tespiti insan serumu veya plazmasında. İçin tasarlanmıştır tanı, izleme ve viral yük kantifikasyonu Hepatit D Virüsü enfeksiyonunun.

Teknik Parametreler:

Testin Prensibi

• Gerçek Zamanlı RT-PCR: Hedefler korunmuş bir bölgesi HDV genomu (örneğin, R0 veya HDAg geni) kullanarak diziye özgü primerler ve TaqMan probları (örneğin, FAM etiketli).

• Yüksek Hassasiyet ve Özgüllük: HBV, HCV veya diğer hepatit virüsleri ile çapraz reaktivite yok.

• İç Kontrol (IC): RNA ekstraksiyonunu ve PCR inhibisyonunu izlemek için dahil edilmiştir (örneğin, RNase P veya sentetik RNA kontrolü).

Kit Bileşenleri

1. RT-PCR Master Mix: İçerir ters transkriptaz, sıcak başlangıçlı Taq polimeraz, dNTP'ler ve optimize edilmiş tampon.

2. Primer/Prob Karışımı: Floresan prob içeren HDV'ye özgü oligonükleotidler (örneğin, HDV için FAM, IC için HEX/VIC).

3. Kontroller:

   • Pozitif Kontrol: Sentetik HDV RNA veya inaktive virüs.

   • Negatif Kontrol: Nükleaz içermeyen su.

   • İç Kontrol (varsa).

4. Diğer Reaktifler: DNase/RNase içermeyen su, reaksiyon tüpleri (varsa).

İş Akışı

1. Numune Hazırlama: Viral RNA ekstraksiyonu (uyumlu QIAamp, MagMAX veya otomatik sistemler).

2. PCR Kurulumu: Ekstre edilmiş RNA'yı master mix ve primerler/problar ile karıştırın.

3. Amplifikasyon:

   • Ters Transkripsiyon: 50°C'de 10–15 dk.

   • PCR Aktivasyonu: 95°C'de 2–5 dk.

   • Döngü: 95°C (10 sn) → 60°C (30–60 sn, floresan okuma) döngülerinden 40–45 döngü.

4. Analiz:

   • Kantitatif: Viral yük için standart eğri (IU/mL veya kopya/mL).

   • Kalitatif: Pozitif/negatif sonuçlar için Ct değeri kesme noktası.

Performans Özellikleri

• Hassasiyet: ≤10–50 IU/mL (%95 LOD).

• Doğrusal Aralık: 10²–10⁸ IU/mL (kantitatif kitler).

• Özgüllük: HBV, HCV, HIV veya diğer yaygın patojenlerle çapraz reaktivite yok.

• Hassasiyet: CV <%5 intra ve inter-assay değişkenliği için.

•