Yalnızca in vitro diagnostik ve profesyonel kullanım içindir.
İsim
Anti-Ct IgG ELISA Test Kiti (Serum/Plazma)
KULLANIM AMACI
Bu kit, Chlamydia trachomatis (Ct) IgG'nin insan serumu/plazmasının kalitatif bir tespitidir. Kit:
Serum/plazmada Ct enfeksiyonunun klinik taraması ve tanısı için uygundur.
TEST PRENSİBİ
Ct antijeni katı fazda polistiren reaksiyon mikroplakasına emilir. Ct IgG antikoru varsa
test örneğinde mikroplakada kaplanmış Ct antijenine bağlanarak antijen-antikor kompleksini oluşturur ve ardından
Antikor etiketli enzime bağlanarak yüzeyde antijen-antikor-antikor kompleksini oluşturur.
Mikro plakanın ve alt tabakanın etkisiyle ilgili kuyucukta mavi renk görüntülenir. Bu nedenle
insan serumunda/plazmasında spesifik olarak Ct IgG'yi tespit edebilir.
TEST PROSEDÜRÜ
1. Tüm reaktifleri kullanımdan önce 15 dakika boyunca oda sıcaklığına dengeleyin.
2. Kullanmadan önce yıkama tamponunu 1:40 seyreltme oranında damıtılmış suyla seyreltin.
3. İlgili kuyucuğa 100μL Sample Diluent ekleyin (Boş kuyucuğa eklemeyin, negatif
kontrol kuyucukları ve pozitif kontrol kuyucuğu.) Numune mikro sayısına karşılık gelmelidir.
plaka, her plakada negatif kontrol 2 kuyucuk, pozitif kontrol 1 kuyucuk ve boş bulunmalıdır
1 kuyusunu kontrol edin. İlgili kuyucuğa 5μL numune ekleyin, pipet kullanarak iyice karıştırın,
Negatif kontrol kuyucuklarına ve pozitif kontrol kuyucuğuna 50μL negatif kontrol ve pozitif kontrol
boşluğu ekleyin).
Not: Her örnek için ayrı bir atık pipet ucu kullanın; Negatif ve Pozitif Kontrol
Çapraz kontaminasyonu önleyin.
4. 30 saniye boyunca karıştırmak için hafifçe sallayın. Sızdırmazlık plakası membranı ile 37°C'de 20 dakika inkübe edin
plakayı mühürlemek.
5. İnkübasyonun sonunda plaka kapağını çıkarın ve atın. Çıkarın, yıkama tamponunu ekleyin
her biri 20 saniye boyunca kuyuda. 5 kez tekrarlayın. Son yıkama işleminden sonra plakayı ters çevirin.
kurutma kağıdı veya temiz havluyu alın ve kalıntıları gidermek için ona hafifçe vurun.
6. Sırasıyla 50μL Enzim Konjugatının eklenmesi (Boş kuyucuğa eklemeyin)
7. Sızdırmazlık plakası membranı plakayı kapatacak şekilde 37°C'de 20 dakika inkübe edin. Tekrarla
Adım 5'teki gibi 5 kez yıkayın.
8. Substrat A 50μL ve Substrat B 50μL ekleyin (Boş kuyucuğa eklemeyin). 37 °C'de inkübe edin
Sızdırmazlık plakası membranının plakayı kapatmasıyla 10 dakika.
9. Her kuyucuğa 50μL Durdurma Solüsyonu ekleyin (Boş kuyucuğa eklemeyin). Yavaşça sallayarak karıştırın, okuyun
Reaksiyon durdurulduktan sonra 10 dakika içinde absorbans. Plaka okuyucuyu Boş ile kalibre edin
iyice ve 450 nm'de absorbansı okuyun. Çift filtreli bir cihaz kullanılıyorsa referansı ayarlayın
630nm'de dalga boyu. Tespit için çift dalga boyu kullanılıyorsa boş kuyucuğun ayarlanmasına izin verilmez. Hesapla
Cut-off değeri ve sonuçları değerlendiriniz.
SONUÇLARIN YORUMLANMASI
Kronometri: Mikro plaka okuyucuyla numunenin optik yoğunluğunu (OD) 450 nm'de okuyun.
Ortalama negatif kontrol OD değeri ≤ 0,1 ve Ortalama pozitif kontrol OD değeri ≥ 0,8, test geçerlidir,
aksi takdirde test geçersizdir.
Kesme değeri (CO) = Negatif kontrolün Ortalama OD değeri x 3 (Ortalama
Negatif kontrol OD değeri < 0,10'dur ve Ortalama negatif kontrol OD'si geçerli olduğunda gerçek değerle hesaplanır.
değer > 0,10)
Pozitif Sonuçlar: Numune OD değeri ≥ CO