2Yıkama tamponunu kullanmadan önce 1:40 oranında damıtılmış su ile seyreltin.
3. 100μL örnek seyrelticini ilgili kuyunun içine ekleyin (boş kuyunun içine eklemeyin, negatif
Kontrol kuyuları ve pozitif kontrol kuyuları.)
plaka, her plaka 2 pozitif kontrol kuyusu, 1 pozitif kontrol kuyusu ve boşluk ile donatılmalıdır
Kontrol 1 kuyusu. 5μL numuneyi ilgili kuyuya ekleyin, pipeti kullanarak iyice karıştırın, ekleyin
50μL negatif kontrol ve pozitif kontrol negatif kontrol kuyularına ve pozitif kontrol kuyusuna (Yapma)
boş kuyunun içine ekleyin).
Not: Her numune için, negatif ve pozitif kontrol için ayrı bir atma pipeti ucu kullanın.
Çapraz kontaminasyondan kaçının.
430 dakika karıştırmak için hafifçe sallayın. 37°C' de mühürleme plaka zarı ile 20 dakika inkubasyon yapın
Plakayı mühürle.
5İnkubasyonun sonunda, tabak kapağını çıkarın ve atın.
Yıkama döngüsünün sonundan sonra tabakayı geri çevirin.
temiz kağıt veya havlu ve kalıntıları çıkarmak için vurun.
6. Nitelikli olarak Enzim Konjugat 50μL eklenir (boş kuyunun içine eklenmez)
7. 37°C' de 20 dakika inkubasyon yapın ve mühürleme plaka zarını mühürleyin.
5. adımda olduğu gibi 5 kez yıkama aşaması.
8. Substrat A 50μL ve Substrat B 50μL ekleyin (boş kuyunun içine eklemeyin).
10 dakika, mühürleme plaka zarı plakanı mühürler.
9Her kuyunun içine 50μL Stop Solution ekleyin (boş kuyunun içine eklemeyin).
Reaksiyonu durdurduktan sonra 10 dakika içinde emilme kapasitesini artırın.
Eğer çift filtreli bir alet kullanılıyorsa, referans değerini ayarlayın.
630nm'de dalga uzunluğu. Eğer tespit için çift dalga uzunluğu kullanıyorsanız boş bir kuyunun ayarlanmasına izin verilmez.
Kesme değeri ve sonuçları değerlendirin.
Kronometri: Mikro plaka okuyucu ile 450nm'de numunenin optik yoğunluğunu (OD) okuyun.
Orta negatif kontrolün OD değeri ≤ 0,1 ve orta pozitif kontrolün OD değeri ≥ 0.8, test geçerlidir,
Aksi takdirde test geçersizdir.
Kesme Değeri (CO) = Negatif kontrolün ortalama OD değeri x 3 (Ortalama olduğunda 0,10 ile hesaplanır)
Negatif kontrolün OD değeri < 0.10, Ortalama negatif kontrol OD olduğunda gerçek değere göre hesaplanır.
Değer > 0,10)
Olumlu Sonuçlar: Örnek OD değeri ≥ CO
Mesajınız 20-3.000 karakter arasında olmalıdır!
Turkish
