1.İstenen mikrotitre kuyucuk sayısını hesaplayın. Kalan mikrotitre kuyucuklarını çıkarın ve kurutucu ile birlikte
yeniden kapatılabilir plastik torbaya koyun, kapatın ve daha sonra kullanmak üzere 2-8°C'de saklayın.
2.Kalibratörleri ve Örnekleri Ekleyin:
2. 1 Boş kuyucuk: Reaktif eklemeyin.
2. 2 Kalibratör kuyucukları: Belirtilen kontrol kuyucuklarına 100 µL Kalibratör ekleyin.
2.3 Test kuyucukları: Test kuyucuklarına 100 µL Örnek Dilüenti ekleyin, ardından ilgili kuyucuğa 10 µL örnek ekleyin.
2.4 Plakayı 20 saniye boyunca nazikçe çalkalayın ve ardından plakayı kapatıcı ile kapatın.
3.İnkübe Edin: Plakayı 30 dakika boyunca 37°C'de inkübe edin.
4.Yıkama Adımı (Manuel veya otomatik yıkama ile yapılabilir):
Manuel yıkama: İnkübasyon karışımını bir atık kabına boşaltarak dikkatlice çıkarın. Her
kuyucuğu 350 µL seyreltilmiş yıkama tamponu ile doldurun ve 20-30 saniye boyunca nazikçe çalkalayın. Yıkama solüsyonunu tamamen atın. 4
kez daha tekrarlayın. Son yıkama adımını tamamladıktan sonra, kalan sıvıyı çıkarmak için plakayı emici kağıt üzerine hafifçe vurun.
Otomatik yıkama: Verimli yıkama sağlamak için otomatik plaka yıkayıcı kalibre edilmelidir. Her kuyucuğu 350 µL
seyreltilmiş yıkama tamponu ile doldurun ve 20-30 saniye bekletin. Tüm kuyucukları tamamen aspire edin. 4 kez daha tekrarlayın.
5.Konjügat: Boş Kuyucuk hariç her kuyucuğa 100 µL konjügat ekleyin.
6.İnkübe Edin: Kuyucukları kapatın ve 30 dakika boyunca 37°C'de inkübe edin.
7.Yıkama Adımı: Plakayı 4. adımda açıklandığı gibi 5 kez yıkayın.
8.Substrat: Boş Kuyucuk dahil her kuyucuğa 50 µL Substrat A ve 50 µL Substrat B ekleyin. Mikrotitre kuyucuklarını
20 saniye boyunca nazikçe çalkalayın. 15 dakika boyunca 37°C'de karanlıkta inkübe edin.
9.Durdurma Solüsyonu: Her kuyucuğa 50 µL Durdurma Solüsyonu ekleyin. Pozitif örnekler içeren kuyucuklarda sarı bir renk gelişmelidir.
10.Sonuçları Okuyun: 30 dakika içinde 450/630-700 nm'de okuyun.
1. Not: Mikroplaka 450 nm'de de okunabilir, ancak daha iyi sonuçlar için 450/630-700 nm'de okunması şiddetle tavsiye edilir.
SONUÇLARIN YORUMLANMASI
Ortalama negatif kontrol OD değeri ≤ 0.1 ve Ortalama pozitif kontrol OD değeri ≥ 0.8 ise test geçerlidir,
aksi takdirde test geçersizdir.
< 0.10 olduğunda 0.10 ile, Ortalama negatif kontrol ODdeğeri 0.10'dan büyük olduğunda gerçek değer ile hesaplanır)
Pozitif Sonuçlar: Örnek OD değeri ≥ C.O.
Mesajınız 20-3.000 karakter arasında olmalıdır!
Turkish
