1- İstenen mikro çukur sayısını hesaplayın. Geriye kalan mikro çukurları çıkarın ve kurutucuyla içine koyun.
yeniden kilitlenebilir plastik torba, mühürlenir ve daha sonra kullanmak için 2-8°C'de saklanır.
2Kalibratörler ve Örnekler Ekle:
2.1 Boş kuyu: Reaktör eklemeyin.
2. 2 Kalibratör çukurları: Belirtilen kontrol çukurlarına 100 μL Kalibratör ekleyin.
2.3 Deneme kuyuları: Deneme kuyularına 100 uL Örnek Seyrelticisi ekleyin, ardından 10 uL örneği karşılık gelen kuyuya ekleyin.
2.4 20 saniye boyunca levhayı hafifçe sallayın ve ardından levhayı mühürleyici ile kapatın.
3İnkubasyon: plaka 37°C' de 30 dakika inkubasyon yapılır.
4. Yıkama Adımı (El ile veya otomatik yıkama ile yapılabilir):
El ile yıkama: Solüsyonu bir atık kapına atarak, inkubasyon karışımını dikkatlice çıkarın.
350 μL seyreltilmiş yıkama tamponuyla iyice karıştırın ve 20-30 saniye boyunca hafifçe sallayın.
Son yıkama aşamasını tamamladıktan sonra, kalıntı sıvıyı çıkarmak için absorbent kağıda plaka vurun.
Otomatik yıkama: Verimli yıkama sağlamak için otomatik bulaşık makinesi kalibre edilmelidir.
Sıvılaştırılmış yıkama tamponuyla 20 ila 30 saniye ıslatın.
5Konjugat: Boş Kuyu hariç her kuyuya 100 μL konjugat ekleyin.
6İnkubasyon: Kuyuları kapatın ve 37°C'de 30 dakika inkubasyon yapın.
7Yıkama Adımı: Plağı 4. Adımda açıklandığı gibi 5 kez yıkayın.
8Substrat: Her kuyunun içine 50 μL Substrat A ve 50 μL Substrat B ekleyin.
20 saniye boyunca mikro çukurlar. 37°C'de karanlıkta 15 dakika inkubasyon yap.
9. Durdurma çözeltisi: Her kuyaya 50 μL durdurma çözeltisi ekleyin. Pozitif numuneleri içeren kuyulara sarı bir renk gelişmelidir.
10. Sonuçlar okunur: 30 dakika içinde 450/630-700 nm'de okunur.
1Not: Mikroplat 450 nm'de de okunabilir, ancak 450/630-700 nm'de okumak şiddetle önerilir.
Daha iyi sonuçlar.